高效液相色譜儀是一種用于化學、生物學、化學工程領域的分析儀器，也是色譜法中一個重要的儀器，以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析。高效液相色譜儀應用很廣泛，基本能對有機化合物中百分之七十到百分之八十的化合物進行分離與檢測。目前，高效液相色譜儀已成為大多數化學行業(yè)和生命科學行業(yè)中的標準配置，如藥物研制和生產、蛋白質、食品安全、環(huán)境、國土安全和石油化工等市場。
高效液相色譜儀一般由輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器、數據記錄及處理裝置等組成。其中輸液泵、色譜柱、檢測器是關鍵部件。有的儀器還有梯度洗脫裝置、在線脫氣機、自動進樣器、預柱或保護柱、柱溫控制器等。
工作流程如下：儲液器中的流動相被高壓泵打入檢測系統(tǒng)，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱(固定相)內，由于樣本溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中作相對運動時，經過反復多次的“吸附-解吸”的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣本濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式輸出檢測結果。
